山东恒温培养箱内只有维持足够的湿度水平才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败，大型培养箱是用蒸汽发生器或喷雾器来控制相对湿度水平的，大多数中、小型培养箱则是通过湿度控制面板的蒸发作用产生湿气的。一些培养箱有一个能在加热的控制面板上保持水份的湿度蓄水池，这样可以增强蒸发作用，此蓄水池能增加相对湿度水平达97-98％。